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Vesículas extracelulares (EVs) são vesículas de membrana derivadas de células que desempenham um papel importante na comunicação e fisiologia célula-a-célula. Os EVs fornecem informações biológicas desde a produção até as células receptoras, através do transporte de diferentes cargas, como proteínas, mRNAs, microRNAs, RNAs não codificantes e lipídios. Os EVs do tecido adiposo poderiam regular as interações metabólicas e inflamatórias dentro dos depósitos de tecido adiposo, bem como nos tecidos distais. Assim, presume-se que os EVs do tecido adiposo estejam implicados em patologias associadas à obesidade, nomeadamente na resistência à insulina e na diabetes mellitus tipo 2 (DM2). Neste estudo, caracterizamos pela primeira vez os VEs secretados pelo tecido adiposo visceral (VAT) e subcutâneo (SAT) de pacientes com obesidade e DM2 com métodos padrão, bem como analisamos sua morfologia com microscopia crioeletrônica. A microscopia crioeletrônica nos permitiu visualizar uma população heterogênea de EVs de vários tamanhos e morfologias, incluindo EVs únicos e EVs com estruturas de membrana interna em amostras de pacientes obesos e também do grupo controle. Prevaleciam vesículas únicas (até 85% para SAT, até 75% para VAT) e maior proporção de VEs com estruturas de membrana interna em comparação com SAT era típica para VAT. Diminuição do tamanho dos EVs SAT simples e duplos em comparação com EVs VAT, grande proporção de EVs multicamadas e todos os EVs com estruturas de membrana interna secretadas por VAT distinguiram pacientes obesos com/sem DM2 do grupo controle. Estas descobertas poderiam apoiar a ideia de biogênese modificada de VEs durante a obesidade e o DM2.